志愿者单次和多次口服美敏伪麻缓释胶囊的药动学研究

盐酸伪麻黄碱、马来酸氯苯那敏和氢溴酸右美沙芬均被收录入我国第一批非处方药目录中。盐酸伪麻黄碱为 α 受体激动剂，可以减轻鼻塞，能够缓解普通感冒和流感引起的鼻部症状，临床资料表明其缓解普通感冒鼻部症状的疗效优于安慰剂。马来酸氯苯那敏为 H1 受体阻滞剂，能够缓解因抗原抗体反应引起组织胺释放导致的临床症状，如过敏或感冒引起的流涕、眼痒、流泪、打喷嚏等。氢溴酸右美沙芬是一种镇咳药，能直接作用于延髓咳嗽中枢，缓解干咳。由这 3种成分组成的美尔伪麻复方制剂主要用于缓解由感冒或过敏引起的上呼吸道症状，如鼻塞、流涕、打喷嚏及咳嗽。目前，国家食品药品监督管理总局已批准美尔伪麻溶液和美敏伪麻咀嚼片上市销售，它们的活性成分均为盐酸伪麻黄碱、马来酸氯苯那敏和氢溴酸右美沙芬，且均为普通释放制剂。美敏伪麻缓释胶囊为含有速释小丸和能在一定时间内发挥作用的缓释小丸，故其有效浓度可维持 12 h，减少了服药次数，提高了用药安全性。伪麻黄碱、氯苯那敏和右美沙芬各自单体或与其他药物组成的复方在健康人体内的药动学研究均有报道。本实验研究了美敏伪麻缓释胶囊在健康人群单、多次给药的药动学特征，希望为美敏伪麻缓释胶囊上市以及临床用药提供支持。

　　1 材料

　　1.1 仪器 LC-MS/MS 系统由日本岛津 LC-20A 液相系统及美国AB公司配备电喷雾离子源的API 4000三重串联四极杆质谱组成。Milli Q纯水机(Millipore，Bedford，MSA)，Corning 320 pH 计，Mettler AX150型分析天平。

　　1.2 药品与试剂 美敏伪麻缓释胶囊由中美天津史克制药有限公司提供，每粒含盐酸伪麻黄碱 90 mg、马来酸氯苯那敏 4 mg、氢溴酸右美沙芬 30 mg，批号PCM050301。盐酸伪麻黄碱(质量分数为 99.8%)、马来酸氯苯那敏(质量分数为 99.7%)、氢溴酸右美沙芬(质量分数为 95.0%)、酒石酸右啡烷(质量分数>99%)对照品均由中美天津史克制药有限公司提供。内标苯丙醇胺购自 Sigma 公司。甲醇、乙腈均为 HPLC 级，由 Fisher提供，醋酸乙酯为分析纯，购自北京化学试剂公司，乙酸铵、氢氧化钠购自北京益利精细化学品有限公司，去离子水由 Milli Q纯化系统制备。空白血浆由受试者捐献。

　　2 方法与结果

　　2.1 试验对象

　　21 名健康男性受试者顺利完成本研究，其中年龄为(32.3±2.57)岁，体质量为(59.9±4.90)kg，身高为(1.66±0.05)m，体质量指数为(21.9±1.50)。所有受试者经生命体征、心电图及各项实验室检查无异常或不具有临床意义的异常，无中枢神经系统、心血管系统、肾脏、肝脏、消化道、呼吸系统、代谢及骨骼肌肉系统的明确病史。AIDS 和肝炎病毒感染者、药物滥用者、最近 3 个月内献血或作为受试者被采样者，以及嗜烟、嗜酒者和试验前两周内曾服用过各种药物者均在筛选中排除。本研究通过北京协和医院伦理委员会的批准，试验前受试者均先签署知情同意书。

　　2.2 给药方法与样本采集 22 例受试者在第 1 天单次服用美敏伪麻缓释胶囊 1 粒，于第 1 天的服药前(0 h)和服药后 0.5、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、5.5、6、6.5、7、7.5、8、8.5、9、9.5、10、10.5、12、13.5、16、24、28、30、34、36、37.5、48、52、58、60、61.5、62、72 h 从前臂静脉采血 3 mL，用于获取受试者单次给药的药动学信息。在第 4～8 天口服美敏伪麻缓释胶囊，1 粒/次，2 次/d，分别于给药前从受试者前臂静脉采血 3 mL。在第 9 天早晨口服 1粒美敏伪麻缓释胶囊，于第 9 天给药前(0 h)和给药后 0.5、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、5.5、6、6.5、7、7.5、8、8.5、9、9.5、10、10.5、11、12、13.5、16、24、28、30、34、36 h 从前臂静脉采血 3 mL，用于获取受试者多次给药达稳时的药动学信息。所有血样在取样 30 min 内，在 4 ℃，4 000 r/min 条件下离心分离15 min，离心后的血浆在−20 ℃条件下保存，待测。 受试者于每个周期试验前 1 天晚上入住 I 期病房，需禁食 10 h 以上，试验第 1 天早上按照试验方案口服美敏伪麻缓释胶囊，200 mL 温开水送服，不能咀嚼或碾碎。服药后医生或护士将检查受试者口腔以确保药物咽下。除服药用的温开水外，服药前及服药后 2 h内禁止饮水，服药后 4、10 h 进食标准早餐、午餐和晚餐(统一的低脂清淡饮食)。单次给药时禁食 4 h，多次给药时禁食 2 h。在试验开始前3 d 内和整个试验期间，受试者禁止饮酒。在试验开始前 24 h 和整个试验期间，受试者禁止饮用含咖啡因的饮料，如咖啡、茶、巧克力、可乐。

　　2.3 安全性评价 整个试验过程由临床医师进行监护，最大限度的保护受试者的安全和权益，并考察试验药物的安全性。在筛选期和试验结束后的随访期抽血血液常规和生化检查，并在给药期间密切注意观察和询问受试者的各种反应，及时记录不良事件的性质、发生频率、处置及转归，并进行相关性分析，同时对试验前后实验室检查结果进行分析。

　　2.4 安全性评价 22 例受试者中有 21 例按照方案要求完成了全部试验样品采集及随访观察，另有 1 例受试者中途发生轻度腹泻，医生进行诊治后恢复，经医生判断与药物无关，并退出试验。另有 1例受试者报告轻度转氨酶升高，为一过性，经医生判断可能与药物相关，未采取医学措施。无严重不良事件报告。

　　2.5 药时曲线及药动学参数 使用 Excel 软件(2013)绘制血浆中伪麻黄碱、氯苯那敏、右美沙芬、右啡烷质量浓度随时间变化的曲线(图 4)。连续给药 4 d、2 次/d 后，伪麻黄碱、氯苯那敏、右美沙芬、右啡烷在第 7、8、9 天的谷浓度无明显改变趋势，说明均达到稳态。 使用 WinNonlin 软件 NCA 模块计算所得的单次、多次给药后伪麻黄碱、氯苯那敏、右美沙芬、右啡烷的平均药动学参数，见表 4。

　　2.6 单、多次药动学评价 美敏伪麻缓释胶囊单次给药后，伪麻黄碱、氯苯那敏、右美沙芬、右啡烷的 AUClast与 AUCinf比较接近，说明基本采样到消除相，与消除相相关的药动学参数可靠。缓释制剂给药后，4 个化合物达峰时间平均值均在 2 h以上，证明具有缓释效果近，右美沙芬的均值虽有升高，但其变异太大，因此经过 t 检验后也无明显差异，提示 4 个化合物的清除率均无时间相关性。

　　3 讨论

　　本实验采用 LC-MS/MS 法测定血浆中伪麻黄碱、氯苯那敏、右美沙芬和右啡烷的药物浓度，该方法方便、灵敏、快速，便于大规模的生物样本分析，适用于人体药动学的研究。

　　从安全性结果来看，只有 1 例受试者出现与药物相关的不良事件，并且为轻度和一过性，无需进行治疗，结果显示美敏伪麻缓释胶囊单、多次给药后安全性良好。 文献报道盐酸伪麻黄碱半衰期为 6～8 h，与本实验结果一致。非索伪麻缓释片(含 120 mg 伪麻黄碱)中伪麻黄碱的 tmax、AUC、Cmax单、多次给药后分别为 5.62～6.00 h、2 722～3 056 μg·h/L、186～194 ng/mL，与本实验结果一致。马来酸氯苯那敏平均半衰期为 18～20 h，与本实验结果一致。混悬液口服后，氯苯那敏的 tmax在 1.4～2.2 h，与美敏伪麻缓释胶囊相比较短，提示美敏伪麻缓释胶囊具有缓释效果。 氢溴酸右美沙芬口服后吸收迅速，但在组织代谢前，经肝广泛代谢，血中的原形药浓度很低。氢溴酸右美沙芬经 O-脱甲基化成为其主要代谢产物右啡烷，其浓度较高，并且也有镇咳作用，因此本研究也同时检测了右啡烷。速释氢溴酸右美沙芬口服后，氢溴酸右美沙芬血药浓度达峰时间约为2～3 h，半衰期为 3～4 h，右啡烷血药浓度达峰时间为 1～2 h，半衰期为 2～4 h，与本实验结果一致。氢溴酸右美沙芬的代谢在肝脏受细胞色素P450 酶、P4502D6 的催化。这种酶存在基因多态性，相对于大多数人(被称为广泛代谢型)，有 7%～10%的白人(被称为缺乏代谢型)此酶功能缺陷[9]。文献报道，有 0.95%的东方人在右美沙芬的代谢方面表现为缺乏代谢型(n=420)，这与整个代谢基因多态性的发生几率是一致的(1.00%，n=3 003)。同时，这个发生率表明，缺乏代谢基因型在东方人中是罕见的[10]。本研究纳入的受试者中无缺乏代谢型报道。 综上所述，美敏伪麻缓释胶囊单、多次给药后伪麻黄碱、氯苯那敏、右美沙芬和右啡烷的吸收具有缓释特征。